产品信息 |
产品货号: NWC1001
细胞名称：143B细胞
中文名：人骨肉瘤细胞（胸腺激酶缺陷细胞）
种属：人
来源： 细胞形态 ：
生长特性：贴壁生长
规格：>1x1000000 个细胞
污染：支原体检测为阴性
培养及冻存条件 |
完全培养基：MEM+10%FBS
培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为 70%-80%。
冻存液：70% MEM，20%FBS，10%DMSO，现用现配。
产品用途 |
仅供科研使用。
发货方式 |
状态良好的细胞于T25细胞培养瓶常温运输，或细胞于冻存管中干冰运输。
细胞培养操作规范 |
细胞复苏：将细胞悬液冻存管快速放置 37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃至融化，移入含有 4-5mL 培养基的 15ml 离心管中混合均匀。在 900-1000RPM 条件下离心 5 分钟， 弃去上清液，加入 5mL 培养基后吹匀，将所有细胞悬液移至培养瓶中培养。
细胞传代：当细胞密度达80%-90%时即可进行细胞传代。
（1）弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 2-3 次；
（2）加 2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使胰酶覆盖整个瓶面，置于 37℃培养箱中消化几分钟后，在显微镜下观察细胞消化情况，若大部分细胞回缩且脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入5ml完全培养基终止消化；
（3）轻轻吹打后吸出溶液移入 15ml 离心管中，900-1000RPM 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，加入新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25 培养瓶按照每5ml细胞悬液分装培养。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，需要先弃去培养上清后对细胞进行消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的 1-2步骤进行。消化完成后，将细胞悬液于900-1000RPM条件下离心5min，弃上清，加入冻存液重悬细胞沉淀，按每1ml 的数量分配到冻存管中（本公司每个冻存管的细胞数目按大于1X106个细胞冻存）。将冻存管放入程序降温盒，放置-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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