技术简介
EdU (5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于EdU与荧光染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数,是一种新型的细胞增殖检测方法。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度
EDU能够竞争性地渗入正在复制的DNA分子中,从而达到标记分裂细胞的目的。在进行体内实验,观察和研究移植细胞的分化、迁移、存活、分布的时候,EDU标记可以起到细胞示踪的作用。
实验流程
①对目的细胞进行常规的细胞培养;
②细胞处理:根据实验需要进行各种药物处理或者细胞转染;
③EdU标记:细胞培养液以1:1000的比例稀释EdU溶液(试剂A),制备适量50μM EdU培养基,每孔每次加入100 μL 50μM EdU培养基孵育2小时;
④细胞固定;
⑤对细胞进行细胞核DAPI染色;
⑥Apollo染色;
⑦图像获取及分析。
结果展示
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服务类型
项目名称 | 内容 | 周期 | 价格 |
细胞增殖检测 | Edu法检测 | 2-3周 |
技术优势
无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;
无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,反应仅需要几分钟;
无需抗体,检测染料仅为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测;
无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期仅需2.5小时;
对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征。
服务流程