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油红O染色
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◆ 实验简介◆

油红O脂肪染色法通常应用于检测组织或细胞内的脂肪情况,油性红OOil Red O)是一种脂溶性染料,是很强的脂溶剂和染脂剂,在脂肪内能高度溶解,其染色原理是油红O能特异性地与组织和细胞内的中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白产生吸附作用从而使脂肪染色。染料在胞内脂质中的溶解度较溶液更大,当燃料加入组织切片时,燃料从有机溶剂转移而溶于组织内的脂质中,使组织内的脂肪呈红色。该染色方法用于分析细胞样品中脂质状况

 

 ◆ 实验方法 ◆

冰冻切片厚度 610µm,不固定或 10%福尔马林固定 10min后水洗;


切片加入60%的异丙醇内浸洗 2min;


用冰蒸馏水稍微清洗一遍;


切片加入改良油红 O 染色液中,密闭染色 1015min,该过程注意避(5)用冰蒸馏水清洗一遍;


加入 60%的异丙醇内稍洗以去除染液(大约几秒);


加入冰蒸馏水中稍微清洗一遍;


Mayer 苏木素染色液复染核 5min;


用冰蒸馏水清洗一遍;


片子用滤纸吸干水分;


用甘油明胶或阿拉伯糖胶封片。




◆ 结果图例 ◆


1682758434127383.jpg 




◆ 注意事项 ◆


项目名称

内容

周期

价格

油红O染色

检测组织或细胞内的脂肪情况

2-3周

询价




◆ 服务流程 ◆


服务流程.jpg




◆ 注意事项 ◆ 


  1. 切片的厚度要稍微厚一些,建议选择8-10μm



  2. 石蜡切片不能用于油红O染色,原因在于石蜡包埋过程中需要脱水,脱水过程中需要乙醇-二甲苯和石蜡,二甲苯是有机溶剂,会把中性脂肪溶解;



  3. 冰冻切片准备时,包埋的降温过程建议选择干冰,原因在于若选择液氮降温过程较强烈,可能导致组织内部炸裂,而干冰降温的过程比较缓和,染出来的片子比较好看;



  4. 实验设计建议设计阴性对照和阳性对照,如阳性对照可以用脂质丰富的肝脏组织等,阴性对照可以根据文献来选择无脂肪沉积的组织。







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