产品简介 His-Tag蛋白Pull-down试剂盒利用组氨酸标签(His-Tag) 与镍离子(Ni²⁺) 的高亲和力作用原理进行蛋白质相互作用研究。 将带有His标签的目的蛋白(诱饵蛋白)通过其His标签,特异性结合到固相化在介质上的镍离子(Ni²⁺) 上。 当含有潜在相互作用蛋白(靶蛋白)的样品溶液(如细胞裂解液、组织裂解液、分泌上清等)流经固定有诱饵蛋白的介质时,能与诱饵蛋白特异性结合的靶蛋白会被捕获并滞留在介质上。通过特定的洗脱条件将捕获的蛋白质复合物(诱饵蛋白-靶蛋白)或单独的靶蛋白从介质上洗脱下来。洗脱产物可直接用于后续的Western blot检测或质谱分析,以鉴定和验证与诱饵蛋白相互作用的蛋白。 本试剂盒适用于多种生物样品来源的Pull-down实验,包括但不限于:细胞裂解液、细胞分泌上清、动物组织裂解液、植物组织裂解液、微生物裂解液等。 |
操作流程 |
试剂盒组分
名称 | 20 Tests规格 | 40 Tests规格 | 储存条件 |
Ni-NTA His-Tag Purification Agarose Resin | 950μL | 1.9 mL | 4℃,1年 |
Lysis Buffer | 24 mL | 48 mL | 4℃,1年 |
Wash Buffer | 70 mL | 140 mL | 4℃,1年 |
Elution Buffer | 1.2mL | 2.2 mL | 4℃,1年 |
Protease inhibitor | 600 μL | 1.2 mL | -20℃,1年 |
需自备试剂:表达His-诱饵蛋白的大肠杆菌、PBS缓冲液、上样缓冲液
所需仪器:超声仪、低温离心机、混匀仪、磁力架